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PerfectQ Universal Green qPCR Premix

簡要描述:PerfectQ Universal Green qPCR Premix:本產(chǎn)品是使用 SYBR Green I 嵌合熒光法進行 qPCR 的專用試劑。

  • 產(chǎn)品型號:
  • 廠商性質(zhì):代理商
  • 更新時間:2024-06-11
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PerfectQ Universal Green qPCR Premix

PerfectQ Universal Green qPCR Premix


本產(chǎn)品是使用 SYBR Green I 嵌合熒光法進行 qPCR 的專用試劑。 核心組分 Perfect Start DNA Polymerase 是基于化學法修飾的熱啟動 DNA聚合酶,配合針對 qPCR 優(yōu)化的***適 Buffer,可以有效抑制非特異擴增,從而顯著提高擴增效率,適用千進行高靈敏度的 qPCR 反應(yīng)。本產(chǎn)品是一種含有 qPCR 反應(yīng)錄適濃度 SYBR Green I 的 2x 預混試劑,可以在寬廣的定量區(qū)域內(nèi)得到良好的標準曲線,對靶基因進行準確定量、檢測,重復性好,可信度高。 本產(chǎn)品中含有特殊的ROX Passive Reference Dye,適應(yīng)千所有 qPCR 儀器,無需在不同儀器上調(diào)整 ROX 的濃度,只需在配制反應(yīng)體系時加入引物和模板即可進行擴增。

適用機型Bio-Rad CFX96™, CFX384™ , iCycler iQ™ , iQ™5, MyiQ™ ,MiniOpticon™ , Opticon® , Opticon 2 , Chromo4™ ; CepheidSmartCycle®;Eppendorf Mastercycle® ep realplex,realplex 2 s;llluminaEco qPCR ; Qiagen/Corbett Rotar-Gene®Q , Rotor-Gene® 3000 ,Rotor-Gene® 6000;Roche Applied Science LightCycler™ 480; ThermoScientific PikoReal Cycler;Applied Biosystems 5700,7000,7300,7700,7900,7900HT, 7900HT Fast;StepOne™,StepOnePlus™;AppliedBiosystems7500 , 7500 Fast , ViiA™7 ; Stratagene MX4000™ ,MX3005P™,MX3000P™。注意:本產(chǎn)品使用特殊的 ROX Passive Reference Dye, 適用于所有qPCR 儀器(無 ROX 校正儀器,低濃度 ROX 校正儀器,高濃度 ROX校正儀器),無需在不同儀器上調(diào)整 ROX 的濃度。注意事項1. 使用前請上下顛倒輕輕混勻,盡量避免起泡,并經(jīng)短暫離心后使用。2. 本產(chǎn)品中含有 SYBR Green I 熒光染料和 ROX 染料,保存本產(chǎn)品或配制 PCR 反應(yīng)液時應(yīng)避免強光照射。3. 如需頻繁使用,可存放于 2-8℃,盡量避免反復凍融,反復凍融可能使產(chǎn)品性能下降。

使用方法1. 在 qPCR 管中配制如下混合液(以 20ul 反應(yīng)體系為例)。

試劑                                                                       20ul 體系 

PerfectQ Universal Green qPCR Premix              10 ul 

Forward Primer,                                                 10uM 0.4ul 

Reverse Primer,                                                 10uM 0.4ul 

Template DNA /cDNA XulRnase-free Water      up to 20ul


注意:反應(yīng)體系中各組分的量可根據(jù)以下原則自行調(diào)整:a. 一般來說,反應(yīng)體系中引物終濃度為 0.2uM 即可得到較好的擴增效果。當反應(yīng)性能比較差時,可以在終濃度 0.1-1.0uM 范圍內(nèi)調(diào)整引物濃度。b. qPCR 靈敏度*高,建立反應(yīng)體系時加入模板量的準確程度對最終定量結(jié)果會有很大的影響。推薦將模板稀釋后加入反應(yīng)體系中,這樣可以有效提高實驗的重復性。c. 如模板類型為未稀釋 cDNA 原液,使用體積不應(yīng)超過 qPCR 反應(yīng)總體積的 1/10。2. 按下列條件進行 qPCR 反應(yīng)

PerfectQ Universal Green qPCR Premix

注意:a. Perfect Start DNA Polymerase 需要熱激活處理以恢復酶活,請至少設(shè)置 PCR 反應(yīng)預變性條件為 95°C 5min。如果模板的 GC 含量較高,可將預變性時間延長至 10min。。b. 延伸時間請根據(jù)使用的 Real-time PCR 儀所需要的數(shù)據(jù)采集最短時間限制自行調(diào)整使用 ABI 7700 和 7900HT 時至少 30s; 使用 ABI 7000和7300時至少31s; 使用ABI 7500時至少34s; 使用ABI StepOnePlus™時至少 10s。c. 儀器類型不同,融解曲線采集程序不盡相同,使用儀器默認融解曲線采集程序即可。


本產(chǎn)品僅供科研使用,請勿用于臨床診斷及其他用途


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